Introducción

El raquitismo de los retoños (Leifsonia xyli subsp. xyli (Davis) Evtushenko) se observó por primera vez en Australia, en el distrito de Mackay (Queensland), durante el verano de 1944-1945 al producirse, sin causa aparente, la pérdida del vigor del cultivar 'Q28' y actualmente la enfermedad está presente en casi todos los países donde se cultiva caña de azúcar (11. CABI. CABI Compendium. CABI Digital Library. 2021. Disponible desde https://doi.org/10.1079/cabicompendium.13712 [Acceso 8 de diciembre 2023].
). En Cuba, se encuentra dentro del inventario de enfermedades bacterianas informadas desde 1953 (22. Chinea A, Zayas E, Bruner S. Inventario de enfermedades de la caña de azúcar en Cuba: tercera etapa. Cuba & Caña. 2019; 22 (3): 8-14.
) y está ampliamente diseminada en las plantaciones comerciales del territorio nacional.

La bacteria coloniza y se multiplica en los haces vasculares de la planta de la caña de azúcar; mientras se extiende sistémicamente a otros órganos (33. Rodríguez JP, Cicarelli M, de Andrade AB, Larissa F, Appezzato B, Aranha LE. Histopathology of the shoot apex of sugarcane colonized by Leifsonia xyli subsp. xyli. Phytopathology. 2022; 112 (10): 2062-2071.
). La disminución de rendimiento agroindustrial, en áreas afectadas, oscila entre 15 y 30 % según la susceptibilidad del cultivar, número de cosechas efectuadas y condiciones agroclimáticas adversas (44. García FHS, Daneluzzi GS, Mazzafera P, de Almeida M, Nyheim O, Azevedo RA, et al. Ratoon Stunting Disease (Leifsonia xyli subsp. xyli) affects source-sink relationship in sugarcane by decreasing sugar partitioning to tillers. 2021; 116. https://doi.org/10.1016/j.pmpp.2021.101723.
). Además reduce el contenido de sacarosa, afecta el crecimiento de las plantas lo que se manifiesta en la disminución de la altura, diámetro y peso de los tallos, y un acortamiento de los entrenudos. Se produce retardo en la brotación y reduce el número de tallos por plantón (55. Riaz M. The Fiji sugar sndustry: Sustainability challenges and the way forward. Sugar Technology. 2022; 24 (3): 662-678. https://doi.org/10.1007/s12355-022-01132-4.
).

En los haces fibrovasculares de la base de los nudos, cuando se hacen cortes longitudinales de un tallo maduro, pueden aparecer coloraciones rojo naranja, en forma de pequeños puntos y rayas (66. Nilima K, Singh A. A review on major diseases of sugarcane (Saccharum officinarum) and their management in India. International Journal of Creative Research Thoughts. 2024; 12 (5): 828-841.
, 77. Wijayanti KS, Hidayah N, Yulianti T, Windiastika G, Supriyono. PCR detection of ratoon stunting disease in sugarcane nursery. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. 2025; 1439; 1-6. https://doi.org/10.1088/1755-1315/1439/1/012005.
). En los brotes jóvenes del plantón de uno a dos meses de edad, se presenta una coloración rosada-salmón de los tejidos de los nudos superiores y del punto de crecimiento (88. Magarey RC, McHardie R, Hession M, Cripps G, Burgess D, Spannagle et al. Incidence and economic effects of ratoon stunting disease on the Queensland sugarcane industry. Proceedings of the Australian Society of Sugar Cane Technologists. 2021; 42: 520-526.
). No existe relación entre la sintomatología interna y externa en las plantas enfermas con raquitismo de los retoños, ambas manifestaciones se pueden presentar juntas o independientes.

En tal sentido, Magarey (99. Magarey R. Field guide diseases of australian sugarcane. Australia. Sugar Research Australia Limited. 2022. 114 pp.
) señaló la ausencia de síntomas externos, además del retraso del crecimiento de las plantas. Frecuentemente, el efecto de la enfermedad se descarta porque los síntomas pueden confundirse con los ocasionados por déficit hídricos o nutricionales, atenciones culturales inadecuadas o presencia de otros agentes nocivos, por lo que es difícil diagnosticar el raquitismo de los retoños por las características fenotípicas de las plantaciones cañeras.

Sobre la base de las consideraciones anteriores se hace necesario la realización de diagnósticos en el laboratorio, a través de técnicas sensibles, rápidas y altamente específicas, que permitan la identificación de las plantas infectadas con la bacteria. Entre las tecnicas descritas se encuentran la microscopia de contraste de fase (1010. Young AJ, Kawamata A, Ensbey MA, Lambley E, Nock CJ. Efficient Diagnosis of Ratoon Stunting Disease of Sugarcane by Quantitative PCR on Pooled Leaf Sheath Biopsies. Plant Disease. 2016; 100 (12): 2349-2545.
); las serológicas: Ensayo Inmuno Enzimático de Fase Sólida (DOT BLOT) (1111. Andreato C, Gazaffi R, Aguiar MM, Aranha LE, Urashima AS. Effect of thermotherapy, Leifsonia xyli subsp. xyli titres, sugarcane genotype and diagnostic techniques on ratoon stunt control in Brazil. Journal of Applied Microbiology. 2022; 133: 1676-1687.
), Ensayo Inmuno Absorbente Ligado a Enzimas (ELISA) e Inmuno Impresión Directa de Tejidos (TBIA) (1212. Parameswari B, Nithya K, Viswanathan R. Sugarcane: Ratoon stunting and Grassy shoot. In: Khan MR, Haque Z, Ahamad F (Eds). Diseases of nationally important field crops. New Delhi. Today & Tomorrow’s Printers and Publishers. 2021. p 235-244.
) y las moleculares como Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) (1313. Racedo J, Noguera AS, Castagnaro AP, Perera MF. Biotechnological strategies adopted for sugarcane disease management in Tucumán, Argentina. Plants. 2023; 12: 1-10.
), Reacción en Cadena de la Polimerasa Cuantitativa en Tiempo Real (qPCR) (88. Magarey RC, McHardie R, Hession M, Cripps G, Burgess D, Spannagle et al. Incidence and economic effects of ratoon stunting disease on the Queensland sugarcane industry. Proceedings of the Australian Society of Sugar Cane Technologists. 2021; 42: 520-526.
) y Amplificación Isotérmica de Ácidos Nucleicos (LAMP) (1414. Burman S, Mason MG, Hintzsche J, Zou Y, Gibbs L, MacGillycuddy L, et al. Changing the diagnostic paradigm for sugarcane: development of a mill-based diagnostic for ratoon stunting disease in crude cane juice. Frontier in Plant Science. 2023; 14: 1-13.
, 1515. Chakraborty M, Bhuiyan SA, Strachan S, Saha S, Mahmudunnabi RC, Nguyen NT, et al. A novel Leifsonia xyli subsp. xyli quantitative LAMP-based diagnostic correlated with sugarcane ratoon stunting disease rating. Crop & Pasture Science. 2024a; 75: 1-11. https://doi.org/10.1071/CP24053 .
, 1616. Strachan S, Chakraborty M, Sallam M, Bhuiyan SA, Ford R, Nguyen NT. Maximising affordability of real-time colorimetric LAMP assays. Micromachines. 2023; 14 (2101): 1-20. https://doi.org/10.3390/mi14112101
).

En Cuba se utilizaron, en el diagnóstico del raquitismo de los retoños, la microscopia de contraste de fase (1717. Chinea A, Pérez G, Matos M. Resistencia genética al raquitismo de los retoños en caña de azúcar Cuba & Caña. 2003; 6 (1): 29-34.
); técnicas serológicas por Inmuno Impresión Directa de Tejidos (TBIA) (1818. Hernández A, Pérez JM, Puchades Y, Casañas D, Delgado J. Leifsonia xyli subsp. xyli en plantaciones comerciales de caña de azúcar. Agrotecnia de Cuba, 2023; 47 (2): 36-45.
) y Ensayo Inmuno Enzimático de Fase Sólida (DOT BLOT) (1919. Guillen D, Hernández R, Rodríguez L, Gómez R. Detección de Leifsonia xyli subsp. xyli en Caña de Azúcar (Saccharum spp.), saneamiento mediante técnicas biotecnológicas. BioTecnología. 2007; 11 (2): 8-17.
); y las moleculares como Hibridación de Ácidos Nucleicos no Radiactiva (HANnr) y la Reacción en Cadena de la Polimerasa: variantes Simple (PCR) y Anidada (nPCR) (2020. Iglesia A, Díaz M, Ramos R. Validación de técnicas para el diagnóstico del raquitismo en los retoños de la caña de azúcar en Cuba. Revista Asociación de Técnicos Azucareros de Cuba. 2011; (3): 18-23.
). Sin embargo, los estudios de dispersión de la enfermedad no han sido sistemáticos.

En los bancos de semilla se utiliza la tinción de los vasos de xilema para determinar la calidad del material a utilizar en las nuevas plantaciones, pero no se realiza ningún análisis de laboratorio para detectar la presencia de L. xyli subsp. xyli. Es evidente entonces, la posible propagación de la enfermedad mediante los propágalos de caña de azúcar y la necesidad de contrastar la sensibilidad de detección de las técnicas. Por ello, el objetivo de este trabajo es identificar la técnica de diagnóstico más factible para la detección de L. xyli subsp. xyli en la caña de azúcar en Cuba.

Materiales y Métodos

Se realizó una revisión sistemática en las bases de datos Google académico (http://scholar.google.es), Scopus (https://www.scopus.com/home.uri), Science Direct (https://www.sciencedirect.com) y Scielo (https://www.scielo.org), utilizando como palabras clave “diagnóstico de enfermedades en caña de azucar”, “Leifsonia xyli subsp. xyli”, “raquitismo de los retoños” y la traducción en inglés “diagnosis of diseases in sugarcane”, “ratoon stunting disease” y “RSD”. La búsqueda abarcó el periodo del 2000 hasta el 2023. Se excluyeron los artículos que no incluían valores de sensibilidad y/o especificidad de una técnica de diagnóstico en comparación con otra.

Con los artículos científicos consultados se conformó una base de datos en Microsoft Excel 2013 que incluyó, para cada uno de estos, año de publicación, autores, país donde se realizó el estudio, revista, técnica de diagnóstico utilizada en la detección del raquitismo de los retoños, número de muestras analizadas por una técnica, número de muestras analizadas por otra técnica y cantidad de muestras con reacción positiva a la bacteria por una u otra técnica, respectivamente.

Se realizó un meta-análisis para el cual se empleó la función metabin de la librería meta de Rstudio versión 1.4.1106 del 2021. Se realizó gráfico de forest plot según razones de odds ratio e intervalo de confianza al 95 %, se graficó el error estándar según intervalo [-2,2].

Resultados

La revisión sistemática de la literatura científica. sobre el raquitismo de los retoños, permitió consultar 518 artículos, en los cuales 120 utilizaron, al menos, una técnica de diagnóstico para la detección de la enfermedad y 24 hacían comparaciones de los resultados por, al menos, dos de estas.

Se identificaron 12 técnicas de diagnóstico para la detección de la bacteria (Fig. 1) y dentro de estas las más utilizadas son: PCR (37 %), nPCR (11 %) y TBIA (10 %) y las menos empleadas: IFI (Microscopía de inmunofluorescencia), IFM (Inmunofluorescencia indirecta) y, solamente en un artículo, se utilizó la HANnr. Sin embargo, las técnicas moleculares se realizan principalmente para investigaciones muy puntuales donde se analizan pocas muestras; mientras que, para estudios más amplios, conducentes a la liberación sistemática del material de los cultivares utilizados como semilla, se utilizan las técnicas serológicas (2121. Romina P, Funes C, Joya CM, Lobo JA, Chaves S, Monachesi MA, et al. Panorama sanitario del cultivo de la caña de azúcar en Tucumán durante la campaña 2021/2022. Reporte Agroindustrial. 2022; 265: 10 p.
).

El estadístico de heterogeneidad alcanzó significación estadística (I²= 85 %, p< 0,01), por lo que las técnicas de diagnóstico difieren entre sí. Según el odds ratio, las técnicas presentan valores similares con la cual se comparan, a excepción de EB EIA y Microscopia de Contraste de Fases. La mayor precisión se obtiene con las técnicas serológica (ELISA) y las moleculares (HANnr y LAMP), muy similares a estas están TBIA y DOT BLOT; mientras que, IFI y IFM tuvieron un intervalo de confianza más amplio.

No hubo diferencias estadísticas significativas (intervalos inclusivos) entre las técnicas analizadas ELISA, HANnr y LAMP. Estas son más precisas para el diagnóstico del raquitismo de los retoños en la caña de azúcar (proporcionan menos falsos negativos).

La técnica de diagnóstico por microscopia de contraste de fases presentó el peor comportamiento, en comparación con el resto de las técnicas, al aportar mayor cantidad de muestras con resultados considerados como falsos negativos con respecto a los verdaderos positivos. Similar comportamiento mostraron EB EIA y la PCR, aunque esta última con mejores resultados. Las otras aportaron mayor número de verdaderos positivos (Figura 2).

Teniendo en cuenta los resultados obtenidos y que ELISA necesita equipamientos para su desarrollo se propone, para las condiciones de Cuba, a la Inmuno Impresión Directa de Tejidos (TBIA) como la técnica de diagnóstico más factible para la detección de L. xyli subsp. xyli en la caña de azúcar.

Discusión

Las técnicas basadas en la microscopía y la serología no tienen la sensibilidad suficiente para detectar bajas concentraciones bacterianas en los tejidos vegetales analizados (2222. Abdalla MME. Detection of the Bacteria Leifsonia xyli subsp. xyli (Davis) Using Lateral Flow Immunoassay Test and Modified Culture Media for Improving the diagnosis of Sugarcane Ratoon Stunt Disease. [Tesis en opción al grado científico de Doctor en Ciencias Agrícolas]. Universidad de Gezira. Sudan. 2020. 52 pp.
); por consiguiente, se tienen que emplear técnicas basadas en el reconocimiento de la molécula de ADN.

Para Hoy et al. (2323. Hoy JW, Grisham MP, Damann KE. Spread and increase of ratoon stunting disease of sugarcane and comparison of disease detection methods. Plant Disease. 1999; 83 (12): 1170-1175.
) la microscopía de contraste de fase puede detectar el agente causal del raquitismo de los retoños directamente de los jugos de la caña de azúcar.

Esta técnica puede determinar el número del agente patógeno cuantitativamente, pero su sensibilidad todavía no es satisfactoria y el procedimiento es tedioso y complicado. Ghai et al. (2424. Ghai M, Singh V, Martin LA, McFarlane SA, Van Antwerpen Y, Rutherford RS. A rapid and visual loop-mediated isothermal amplification assay to detect Leifsonia xyli subsp. xyli targeting a transposase gene. Letters in Applied Microbiology. 2014; 59: 648-657.
) observaron, al comparar los resultados del diagnóstico del raquitismo de los retoños de la IFI y IFM con la LAMP, que son semejantes. Estas técnicas no se utilizan de forma rutinaria porque requieren mucho tiempo para su ejecución, son caras y necesitan la producción de antisueros policlonales.

La PCR tiene alta confiabilidad y especificidad para la detección de L. xyli subsp. xyli (2525. Houllou LM, Torres DCBA, Medeiros MJL, Dantas PVP, Soares AB, Souza RA, et al. Electrotherapy treatment for ratoon stunting disease (Leifsonia xyli subsp. xyli) elimination in sugarcane micropropagation. International Jour. Current Research. 2015; 7: 19888-19892.
). Sin embargo, algunas sustancias presentes en los tejidos de las plantas (polisacáridos, proteínas, compuestos fenólicos y otros metabolitos secundarios) pueden interferir en la amplificación del ADN lo que conlleva a que aumente el número de muestras en las cuales se detecten tanto, falsos negativos como positivos (2626. Schori M, Appel M, Kitko A, Showalter AM. Engineered DNA polymerase improves PCR results for plastid DNA. Applications in Plant Sciences. 2015; 1: 1-7.
).

Los polisacáridos y polifenoles pueden contaminar e inhibir la extracción del ADN u oxidar este durante el proceso de lisis (2727. Suazo T, Miranda S, Rivers E, Lacayo M, Tenorio D. Evaluación de metodologías de extracción de ADN de plantas recalcitrantes. Revista Torreón Universitario. 2020; 9 (24): 45-57. https://doi.org/10.5377/torreon.v9124.9723 .
). Esta situación provoca la aparición de muchos falsos negativos en el diagnóstico de la bacteria cuando se utilizan técnicas moleculares. En este mismo sentido, Angulo et al. (2828. Angulo L, Molina EA, Figueroa R, Parada F. Optimización de un protocolo para aislamiento de ADN en tejido foliar de cacao (Theobroma cacao L.) para la amplificación con marcadores moleculares. Revista Científica ECOCIENCIA. 2023; 10 (4): 68-87.
) plantearon que varios tipos de metabolitos secundarios (flavonoides, terpenos, polifenoles, quinonas y alcaloides) secretados por las plantas y otros componentes en sus tejidos pueden interferir con la calidad de la extracción y purificación del ADN, lo cual disminuye la eficacia de acoplamiento e inhibición de la Taq polimerasa en la PCR.

Según lo planteado por Iglesia et al. (1414. Burman S, Mason MG, Hintzsche J, Zou Y, Gibbs L, MacGillycuddy L, et al. Changing the diagnostic paradigm for sugarcane: development of a mill-based diagnostic for ratoon stunting disease in crude cane juice. Frontier in Plant Science. 2023; 14: 1-13.
) la HANnr presenta ventajas tecnológicas y económicas evidentes sobre los ensayos de PCR, en cuanto a la facilidad de manipulación, la disminución de los riesgos de contaminación, el costo inferior de infraestructura y la posibilidad de procesar un mayor número de muestras. Esta última no puede detectar concentraciones muy bajas de la bacteria en plantas utilizadas como semilla, por lo que se puede comprometer la salud de las futuras plantaciones (2929. Duarte V, Carrer R, Gomes M. Comparison of Leifsonia xyli subsp. xyli molecular detection in heat-treated sugarcane sets. Pesquisia Agropecuaria Tropical. 2019; 49: 1-7.
). Además, nPCR es más específica y sensible, lo que disminuye los porcentajes de falsos negativos en el diagnóstico del raquitismo de los retoños; es rápida en su ejecución y no requiere el equipo sofisticado; también permite conservar las muestras por un período más largo antes de procesarla.

Cuando Wu et al. (3030. Wu Q, Pan YB, Zhou D, Grisham MP, Gao S, Su Y, et al. A comparative study of three detection techniques for Leifsonia xyli subsp. xyli, the causal pathogen of sugarcane Ratoon stunting disease. BioMed research international. 2018; 1-11. https://doi.org/10.1155/2018/2786458.
), compararon las técnicas de diagnóstico PCR, qPCR y LAMP; determinaron que esta última tiene mayor simplicidad en su ejecución, es más rápida y muy específica. La LAMP se informó ampliamente en la literatura, como una técnica de diagnóstico en la detección de agentes patógenos en las plantas comparable, en cuanto la sensibilidad y especificidad, a la qPCR y nPCR (3131. Serena S, Loconsole G, Ligorio A, Pantazis AK, Papadakis G, Gizeli E, et al. A colorimetric LAMP detection of Xylella fastidiosa in crude alkaline sap of olive trees in apulia as a field-based tool for disease containment. Agriculture. 2023; 13 (2): 448.
).

La baja sensibilidad de la qPCR pudiera ser debido a la pérdida de ADN de L. xyli subsp. xyli durante la extracción del ácido nucleico y la purificación, la presencia los inhibidores de la polimerización del ADN, o ambos (3232. Sidstedt M, Rådström P, Hedman J. PCR inhibition in qPCR, nPCR and MPS-mechanisms and solutions. Analytical bioanalytical Chemistry. 2020; 412: 1-16.
). No obstante, también la sensibilidad extrema de la LAMP pudiera dar falsos positivos (3333. Bao Y, Jiang Y, Xiong E, Tian T, Zhang Z, Lv J, et al. CUT-LAMP: contamination-free loop-mediated isothermal amplification based on the CRISPR/Cas9 cleavage. ACS Sensors. 2020; 5: 1082-1091. https://doi.org/10.1021/acssensors.0c00034 .
).

La qPCR solo se puede realizar en laboratorios especializados de diagnósticos, esta técnica es complicada en su ejecución y necesitan mucho tiempo para procesar las muestras; sin embargo, proporciona la cuantificación de los agentes patógenos; por lo que es una medida indirecta de la magnitud de la infección en una plantación de caña de azúcar (1111. Andreato C, Gazaffi R, Aguiar MM, Aranha LE, Urashima AS. Effect of thermotherapy, Leifsonia xyli subsp. xyli titres, sugarcane genotype and diagnostic techniques on ratoon stunt control in Brazil. Journal of Applied Microbiology. 2022; 133: 1676-1687.
). En contraste, la LAMP es un método semi-cuantitativo; sin embargo, Burman et al. (1515. Chakraborty M, Bhuiyan SA, Strachan S, Saha S, Mahmudunnabi RC, Nguyen NT, et al. A novel Leifsonia xyli subsp. xyli quantitative LAMP-based diagnostic correlated with sugarcane ratoon stunting disease rating. Crop & Pasture Science. 2024a; 75: 1-11. https://doi.org/10.1071/CP24053 .
) observaron correlación positiva con la cantidad de ADN de L. xyli subsp. xyli en el jugo de las muestras, con las concentraciones bacterianas en las plantas estudiadas.

La LAMP es superior a la PCR y EB-EIA en su simplicidad y rapidez de ejecución que permite un diagnóstico exacto y eficaz. La PCR necesita tiempo en la electroforesis en gel de agarosa y requiere de equipos que son caros en el mercado. Es más sensible que EB EIA por lo que presentará menos falsos negativos (2525. Houllou LM, Torres DCBA, Medeiros MJL, Dantas PVP, Soares AB, Souza RA, et al. Electrotherapy treatment for ratoon stunting disease (Leifsonia xyli subsp. xyli) elimination in sugarcane micropropagation. International Jour. Current Research. 2015; 7: 19888-19892.
).

Por otro lado, las técnicas de diagnósticos serológicas todavía se prefieren para la detección de agentes patógenos, ya que se pueden analizar grandes cantidades de muestras por campo de manera rentable (3434. Urashima AS, Silva MF, Coraini NF, Gazaffi R. Temporal incidence of Leifsonia xyli subsp. xyli in sugarcane propagating materials of Brazilian cultivars. Crop Protection. 2020; 128: 1-7. https://doi.org/10.1016/j.cropro.2019.104976 .
). Se emplean para la detección rápida, tanto cualitativa como cuantitativa, de agentes patógenos en plantas. Las mismas se basan en la especificidad y alta afinidad de las interacciones entre un anticuerpo y un antígeno (3535. Strachan S, Shamsul A, Thompson N, Nguyen NT, Ford R, Muhammad JA. Latent potential of current plant diagnostics for detection of sugarcane diseases. Current Research in Biotechnology. 2022; 4: 475-492.
).

La PCR requiere de instrumentos más costosos y el análisis de las muestras se demora mucho tiempo; mientras que, el ELISA necesita de concentraciones más altas de L. xyli subsp. xyli en el jugo de caña de azúcar infectada para su detección. Los ensayos que requieren una diana molecular, necesitan de la extracción del ADN genómico. En el desarrollo del diagnóstico por PCR es necesario el empleo de inhibidores de esta técnica debido a su existencia en los tejidos vegetales (polisacáridos, proteínas, compuestos fenólicos y otros metabolitos secundarios de las plantas), que tienden a interferir en la reacción. Estas sustancias son difíciles de detectar y eliminar del procedimiento de extracción de ADN genómico. Requieren de equipos de alto costo, lo que restringe su aplicación en países de escasos recursos (3636. Chakraborty M, Soda M, Strachan S, Ngo CN, Bhuiyan SA, Ford R. Ratoon Stunting Disease of Sugarcane: A Review Emphasizing. Phytopathology. 2024; 114: 7-20. https://doi.org/10.1094/PHYTO-05-23-0181-RVW .
).

En Jamaica, Falloon et al. (3737. Falloon T, Henry E, Davis MJ, Fernandez E, Girard JC, Rott P, et al. First report of Leifsonia xyli subsp. xyli, causal agent of ratoon stunting of sugarcane, in Jamaica. Plant Disease. 2006; 90 (2): 245-245.
) utilizaron TBIA para la detección del raquitismo de los retoños y la confirmación de las muestras dudosas por esta técnica la analizaron mediante nPCR. Mientras que, ELISA y TBIA son utilizadas en la detección de L. xyli subsp. xyli en los propágalos destinados a semilla agámica en la propagación de la caña de azúcar. Parameswari et al. (1212. Parameswari B, Nithya K, Viswanathan R. Sugarcane: Ratoon stunting and Grassy shoot. In: Khan MR, Haque Z, Ahamad F (Eds). Diseases of nationally important field crops. New Delhi. Today & Tomorrow’s Printers and Publishers. 2021. p 235-244.
), al comparar estas determinaron que la primera era más sensible, por lo que la segunda da más falsos negativos.

El DOT-BLOT se emplea en Brasil para determinar la distribución de L. xyli subsp. xyli en las plantaciones cañeras (3838. Urashima AS, Silva MF, Correa JJ, Moraes MC, Singh AV, Smith EC, et al. Prevalenceand severity of ratoon stuntin commercial brazilian sugarcane fields. Plant Disease. 2017; 101 (5): 815-821. http://dx.doi.org/10.1094/PDIS-07-16-1030-RE .
); mientras que, en Argentina se utiliza la técnica TBIA para el diagnóstico del raquitismo de los retoños en la semilla agámica de la caña de azúcar (3939. Bertani RP, Funes C, Joya CM, Lobo JA, Chaves S, Monachesi MA, et al. Panorama sanitario del cultivo de la caña de azúcar en Tucumán durante la campaña 2021/2022. Reporte Agroindustrial. 2022; 265: 1-10.
).

Las tecnologías moleculares se consideran más sensibles y específicas que la investigación microscópica y los ensayos serológicos, son más costosas, requieren mayor habilidad y mano de obra. Con frecuencia, también implican procedimientos de bioensayo complejos y requieren equipo adicional, en particular para la preparación de muestras, por lo que no son completamente adecuadas para su aplicación en la explotación (1515. Chakraborty M, Bhuiyan SA, Strachan S, Saha S, Mahmudunnabi RC, Nguyen NT, et al. A novel Leifsonia xyli subsp. xyli quantitative LAMP-based diagnostic correlated with sugarcane ratoon stunting disease rating. Crop & Pasture Science. 2024a; 75: 1-11. https://doi.org/10.1071/CP24053 .
, 3636. Chakraborty M, Soda M, Strachan S, Ngo CN, Bhuiyan SA, Ford R. Ratoon Stunting Disease of Sugarcane: A Review Emphasizing. Phytopathology. 2024; 114: 7-20. https://doi.org/10.1094/PHYTO-05-23-0181-RVW .
).

Conclusiones

Se identificó la Inmuno Impresión Directa de Tejidos (TBIA) como la técnica de diagnóstico más factible para la detección de L. xyli subsp. xyli en la caña de azúcar en Cuba.

Referencias