Pesquisa serológica y molecular de Brucella sp. en un rebaño bufalino lechero en la Cuenca del Sur del Lago de Maracaibo
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Resumen
En el siguiente estudio se presentan los resultados de un protocolo de diagnóstico de Brucelosis bovina, en una finca lechera bufalina (Bubalus bubalis) con problemas reproductivos. Un rebaño total de 80 búfalos se sometió a tamizaje con la prueba rápida de Rosa de Bengala (RB) y la prueba de microaglutinación para Brucella. Los resultados obtenidos se confirmaron con el ensayo de microaglutinación con 2-Mercaptoetanol, fluorescencia polarizada (FPA) y diagnóstico molecular por PCR, con la amplificación de la región 16S ADNr del género Brucella. El tamizaje detectó 51,25% (41/80) de reactores con RB, la prueba de microaglutinación con fenol detectó 8,75% de animales positivos (7/80) y, posteriormente, las técnicas confirmatorias de 2- Mercaptoetanol y FPA detectaron 6,25% (5/80) de animales positivos. El índice de Kappa para la prueba de tamizaje RB, comparada contra 2- Mercaptoetanol, fue de 0,119; para el ensayo de microaglutinación con fenol contra 2-Mercaptoetanol de 0,820 y de FPA contra 2-Mercaptoetanol fue de 1,0.
Se evidenció una baja concordancia para RB contra 2-Mercaptoetanol y de buena a excelente para microaglutinación con fenol y FPA contra 2-Mercaptoetanol. La PCR logró detectar el 100% de los animales confirmados (5/5 animales). Las técnicas serológicas como FPA y el diagnóstico directo por PCR se convierten en valiosas herramientas para estudiar la brucelosis animal en zonas de alto riesgo, sin realizar aislamiento de la bacteria.
Palabras clave: Bubalus bubalis, Brucella sp., diagnóstico.
Serological and molecular investigation of Brucella sp. in a dairy buffalo herd at the south basin of Lake Maracaibo
ABSTRACT: The results of a diagnostic protocol for bovine brucellosis in a buffalo (Bubalus bubalis) dairy farm with reproductive failures are informed. A herd of 80 buffaloes was subjected to a screening with the
Rose Bengal (RB) and Brucella agglutination (BMAT) tests, and the results subsequently confirmed by using the 2- mercaptoethanol agglutination test (2-ME), the fluorescence polarization assay (FPA) ) and the molecular diagnosis by PCR of the 16S rDNA region of the genus Brucella. The screening detected 51.25% (41/80) RB reactors and 8.75% positive animals (7/80) on BMAT. The confirmatory techniques (2-ME and FPA) detected 6.25% (5/80) of positive animals. The Kappa index was 0.119 for RB compared with 2-ME , 0806 for BMAT against 2-ME, and 1.0 for FPA against 2-ME. A low agreement for RB to 2-mercaptoethanol and high to excellent for agglutination with phenol and FPA was evident. The PCR detected 100% of the confirmed animals (5/5 animals). Serological techniques such as FPA and direct diagnosis by PCR become valuable tools for animal brucellosis diagnosis without bacterial isolation in high risk areas.
Key words: Bubalus bubalis, Brucella sp., diagnosis.
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