Detección por nPCR de Anaplasma marginale y Babesia bovis en búfalos (Bubalus bubalis) en el Occidente de Cuba

Abstract

Desde su introducción en Cuba en la década de los ochenta, la especie bubalina ha mostrado excelentes resultados productivos, adaptabilidad y resistencia a las enfermedades; sin embargo, el estado de salud de los rebaños ha sido poco estudiado. En varios países se ha reportado que los búfalos son infectados por Anaplasma marginale y Babesia bovis, y pueden permanecer como portadores asintomáticos de estos hemoparásitos. Este trabajo se realizó para demostrar que los búfalos de la región occidental de Cuba son portadores de Anaplasma marginale yBabesia bovis. Para ello se estandarizó un ensayo de nPCR para la detección de A. marginale, con el que se amplifica un fragmento de 345pb del gen msp5, que se empleó en el análisis de 52 muestras de sangre de búfalos, seleccionados al azar en seis granjas del Occidente de Cuba, a los que previamente se les realizó frotis sanguíneo. Las muestras fueron analizadas, posteriormente, con un ensayo de nPCR para el diagnóstico de B. bovis, que amplifica un fragmento de 298pb del gen rap1. Como resultado se obtuvo que 47 muestras (90,4%) resultaron positivas en el nPCR para A. marginale, mientras que solo cinco muestras (9,6%) fueron positivas en el frotis sanguíneo; en el caso de B. bovis, resultaron positivos en el análisis por nPCR 20 animales (38,4%) y todos fueron negativos por el frotis sanguíneo. La distribución de los casos positivos, tanto para A. marginale como para B. bovis, abarcó el total de las granjas muestreadas. Se confirmó el diagnóstico por nPCR de A. marginale, a través de un análisis con enzimas de restricción del fragmento de ADN amplificado y también mediante la secuenciación de uno de los fragmentos amplificados; la confirmación del diagnóstico por nPCR de B. bovis se realizó mediante la secuenciación de uno de los fragmentos amplificados. Las secuencias obtenidas se depositaron en el GenBank y se compararon con las secuencias disponibles de los genes msp5 y rap1, respectivamente. Se comprobó que ambas secuencias presentaban elevado porcentaje de identidad con las secuencias de varios aislados geográficos. Se concluyó que los búfalos en el Occidente de Cuba son portadores de A. marginale y B. bovis.