Implementación en Cuba de un ensayo molecular para la detección de Brucella spp. en humanos

Contenido principal del artículo

Odisney Lugo Suárez
Ana Margarita Obregón Fuentes
Eduardo Echevarría Pérez
Yaindrys Rodríguez Olivera

Resumen

La brucelosis es una zoonosis que puede cursar con síntomas leves o con manifestaciones severas. Las técnicas moleculares son muy sensibles y específicas en la detección oportuna y precoz del ADN de Brucella spp., tanto al inicio de la infección como en las recidivas y en las fallas terapéuticas. El propósito de la presente investigación fue implementar una PCR convencional (bcsp) que permita el diagnóstico oportuno de la brucelosis humana en Cuba, y así contribuir a evitar la aparición de complicaciones que pueden provocar secuelas invalidantes en el paciente. Se realizó una investigación de servicios y sistemas en el Laboratorio Nacional de Referencia de Brucelas del IPK para evaluar la PCR-bcsp. Se determinaron los parámetros de sensibilidad y especificidad analíticas, así como sensibilidad y especificidad diagnósticas. La PCR convencional se aplicó a 86 sueros de casos sospechosos de brucelosis humana que resultaron negativos a los ELISAs IgM e IgG para Brucella . La PCR-bcsp presentó un límite de detección de 6,403 fg/µL, la especificidad analítica fue del 100 %, mientras que la sensibilidad y la especificidad diagnósticas mostraron valores de 96,3 % y 100 %, respectivamente. Tras su aplicación en sueros de casos probables de brucelosis humana negativos por serología se alcanzó un 85 % de positividad. La presente investigación fortaleció el diagnóstico microbiológico de la brucelosis humana en Cuba porque quedó implementada una herramienta molecular que garantiza el diagnóstico temprano de la enfermedad en nuestro medio.

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1.
Lugo Suárez O, Obregón Fuentes AM, Echevarría Pérez E, Rodríguez Olivera Y. Implementación en Cuba de un ensayo molecular para la detección de Brucella spp. en humanos . Rev. Salud Anim. [Internet]. 30 de enero de 2024 [citado 14 de noviembre de 2024];46:https://cu-id.com/2248/v46e01. Disponible en: https://revistas.censa.edu.cu/index.php/RSA/article/view/1306
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Laine CG, Johnson VE, Scott HM, ArenasGamboa AM. Global Estimate of Human Brucellosis Incidence. Emerg Infect Dis. 2023; 29(9):1789-97. DOI: 10.3201/eid2909.23 0052. PMID: 37610167; PMCID: PMC1046 1652.

Alharbi MGT, Alanazi AS, Alanazi NF, Alsaleh AK, Alanazl SJ, Alanazi SM, et al. Overview of Brucellosis: Simple Review Article. Pharmacophore. 2022;13(2):101-6. Available in: https://doi.org/10.51847/oSqu90fp0k.

O'Callaghan D. Brucelosis humana: avances recientes y retos futuros.InfectDisPoverty. 2020; 9(101). Available in: https://idpjournal.biomed central.com/articles/10.1186/s40249-020-00715-1

Amjadi O, Rafiei A, Mardani M, Zafari P, Zarifian A. A review of the immunopathogenesis of Brucellosis. Infect Dis. 2019; 51 (5): 321-33. DOI: 10.1080/23744235.2019.1568545

Yagupsky P, Morata P, Colmenero JD. Laboratory Diagnosis of Human Brucellosis. ClinMicrobiol Rev. 2019;33(1):e00073-19. DOI: 10.1128/CMR.00073-19.

Thakura S, Bedia J, Singha R, Gillb K, Arorac A, Kashyap N. Quantitative polymerase chain reaction based quantification of Brucella DNA in serum of pre- and post-therapeutic occupationally exposed infected human population. Journal of Infection and Public Health 2018;11(4): 514-20. DOI:10.1016/j.jiph. 2017.10.004

Projahn M, Hammerl JA, Dieckmann R, Dahouk SA. A Proof of Principle for the Detection of Viable Brucella spp. in Raw Milk by qPCR Targeting Bacteriophages. Microorganisms. 2020;8(9):1326. DOI: 10.3390/microorganisms 8091326.

Wang Y, Wang Z, Zhang Y, Bai L, Zhao Y, Liu C, et al.. Polymerase chain reaction-based assays for the diagnosis of human brucellosis. Ann Clin Microbiol Antimicrob2014; 13:31. DOI: 10.118 6/s12941-014-0031-7

Lugo O, Obregón AM, Echevarría E, Rodríguez Y, Soto Y. Aspectos clínicos y epidemiológicos de la brucelosis humana en tres provincias cubanas (2013-2016). Rev Cubana Med Trop2022; 74(2):e784. Disponible en: https:// revmedtropical.sld.cu/index.php/medtropical/arti cle/view/784.

Baily GG, Krahn JB, Drasar BS, Stoker NG. Detection of Brucella melitensis and Brucella abortus by DNA amplification. J. Trop. Med. Hyg. 1992; 95:271-5. PMID: 1495123.

Mukherjee F, Nagmani K, Surendra KSNL, Subramanian BM, Bahekar VS, Prasad A, et al.. Optimization and validation of a diagnostic realtime PCR for bovine brucellosis. AdvAnim VetSci. 2015; 3(11): 577-87. DOI:10.14737/ journal.aavs/2015/3.11.577.587.

QIAGEN. Manual de instrucciones de uso de QIAsymphony DSP DNA 2015; 40 p. Disponible en: http://www.qiagen.com.

Al- Khater B, Al- Ouqaili M, Al- Anii S. In Term of Molecular Technique, Taxonomic and Diagnostic Aspects of Chronic Human Brucellosis in Ramadi City. Anb Med J. 2020; 12(1):1-12. DOI: 10.33091/AMJ.0101212015.

Talmaci R, Traeger-Synodinos J, Kanavakis E, Coriu D, Colita D, Gavrila L. Scanning of betaglobin gene for identification of beta-thalassemia mutation in Romanian population. J Cell Mol Med. 2004;8(2):232-40. DOI:10.1111/j.1582-49 34.2004.tb00278.x.

Ariza X. Brucelosis. En: Rozman C, Cardellach F, Agustí A, et al., editores. Tratado de Medicina Interna Farreras-Rozman. Vol 2. 19ª ed. España: Elsevier; 2020. p. 2045-7.

Mitka S, Anetakis C, Souliou E, Diza E, Kansouzidou A. Evaluation of different PCR assays for early detection of acute and relapsing brucellosis in humans in comparison with conventional methods. J Clin Microbiol. 2007; 45(4):1211-8. DOI:10.1128/JCM.00010-06

Cecmed. Regulación No. 47-2007: Requisitos para la evaluación del desempeño de los diagnosticadores. Disponibleen: http://www.cecmed.cu/Pages/AmbReg-8.htm.

Zerva L, Bourantas K, Mitka S, Kansouzidou A, Legakis NJ. Serum Is the Preferred Clinical Specimen for Diagnosis of Human Brucellosis by PCR. J. Clin. Microbiol. 2001; 39 (4): 16614. DOI:10.1128/JCM.39.4.1661-1664.2001.

Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA. Brucella y Francisella. En: Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA. Microbiologíamédica. 9na ed. España: Elsevier; 2021. p. 383-90.