Primer informe de Typhlocybinae como vectores potenciales de fitoplasmas en Cnidoscolus chayamansa (Miller) I.M. Johnst. (chaya) en Cuba

Abstract

El objetivo del trabajo fue identificar los saltahojas presentes en plantas de chaya (Cnidoscolus chayamansa (Miller) I.M. Johnst.) e indicar la presencia de fitoplasmas en los insectos y las hojas con síntomas. Se recolectaron 40 saltahojas adultos y 50 hojas de tres plantas con síntomas asociados a fitoplasmas en el municipio 10 de Octubre, provincia La Habana, Cuba, durante el periodo de febrero a abril de 2015. Para la identificación de los saltahojas se utilizaron claves dicotómicas, luego de realizar montajes de estos insectos en portaobjetos planos, bajo un microscopio estereoscópico Stemi DV4 y analizarlos en Microscopio AxioLab. A1 con monitor y cámara fotográfica acoplada. Los fitoplasmas se detectaron mediante la extracción del ácido desoxirribonucleico (ADN) por el método de CTAB 2%, con cebadores universales para la amplificación genérica de la región ADNr 16S (R16mF2/R16mR1, R16F2n\R16R2). Para la primera amplificación se empleó la combinación de los iniciadores universales R16mF2 y R16mR1 y para la reacción anidada R16F2n/ R16R2. Para confirmar los resultados alcanzados, los productos de la digestión se analizaron en una cámara de electroforesis en un gel de agarosa (1%) y se compararon con los controles positivos de fitoplasmas, obtenidos de plantas de Catharanthus roseus (L.) G. Don. Los saltahojas identificados fueron Empoasca canavalia DeLong y Empoasca papayae Oman. Se encontró la presencia de fitoplasmas en hojas sintomáticas y en los insectos. La determinación de las dos especies de saltahojas y de fitoplasma en chaya y en insectos constituyen los primeros informes en Cuba.

Palabras clave: Cnidoscolus chayamansa, Typhlocybinae, Empoasca, fitoplasmas.

First report of Typhlocybinae as potential vectors of phytoplasmas in Cnidoscolus chayamansa (chaya) in Cuba

ABSTRACT: With the aim of identifying the presence of phytoplasmas in insects and leaves, forty leafhopper adults and 50 leaves of three plants with symptoms associated with phytoplasmas, were collected at the municipality of10 de Octubre, Havana, from February to April 2015. For leafhopper taxonomical identification by using dichotomic keys, they were mounted on flat slides under a Stemi DV4 stereo microscope and observed under an AxioLab. A1 microscope with a monitor and camera attached. Phytoplasmas were detected by extracting the DNA by the 2% CTAB method and using universal primers for the generic amplification of the region ADNr 16S (R16mF2/R16mR1, R16F2n\R16R2). For the first amplification, the combination R16mF2 and R16mR1 was used, and R16F2n/ R16R2 for the nested reaction. The products of amplification were analyzed by electrophoresis on agarose gel (1%). The profiles obtained were compared with phytoplasma positive controls from Catharanthus roseus (L.) G. Don. plants. The leafhoppers identified were Empoasca canavalia DeLong and Empoasca papayae Oman, and the presence of phytoplasma was found in leaves with symptoms as well as in the insects. The presence of these two leafhopper species and phytoplasmas in chaya and insects are the first reports in Cuba.

Key works: Cnidoscolus chayamansa, Typhlocybinae, Empoasca, phytoplasmas.